Биопленки в эякуляте – одна из причин нарушений фертильности

С докладом «Влияние препарата бовгиалуронидаза азоксимер на возможность разрушения биопленок в эякуляте: результаты рандомизированного клинического исследования» выступил Л.Г. Спивак, д.м.н., профессор Института урологии репродуктивного здоровья Сеченовского Университета. 

Репродуктивное здоровье мужчин является актуальной проблемой не только современной урологии и андрологии, но и всей отрасли здравоохранения в целом. Докладчик сообщил, что нарушения фертильности зачастую связаны с воспалительным процессом в ПЖ. По данным Всемирной организации здравоохранения, одна из 5–7 пар репродуктивного возраста страдает бесплодием, и в половине случаев причиной этого является нарушение качества спермы у мужчины ¹. «Это подтверждено рядом исследований, поэтому крайне важно рассматривать воспаление в предстательной железе и с позиции сохранения фертильности», – подчеркнул специалист.

Он также добавил, что хронический простатит (ХП) диагностируется у мужчин всех возрастов. Но наиболее часто он встречается у мужчин репродуктивного возраста (8–35% пациентов в возрасте от 20 до 40 лет) ². Также есть данные, что симптомы ХП хотя бы раз в жизни появляются у 50% мужчин ³. Среди них у 5% диагностируется бактериальный простатит, у 65% – небактериальный простатит, у 30% – синдром хронической тазовой боли (СХТБ) ³.

В своей практике урологи используют классификацию ХП, созданную Национальным институтом здоровья США в 1995 г. Согласно этой классификации чаще всего (в 90–95% случаев) развивается абактериальный ХП / СХТБ ⁴. Эта категория разделяется на две группы: с повышением и без повышения количества лейкоцитов в секрете ПЖ. 
По мнению докладчика, данная теория вызывает ряд вопросов, поскольку большие систематические обзоры, метаанализы исследований свидетельствуют о том, что урогенитальный тракт мужчина не стерилен, содержит разнообразные микроорганизмы ⁵. «Корректность термина «абактериальный простатит» вызывает сомнения», – подчеркнул специалист. 

Он напомнил также, что микроорганизмы в организме образуют бактериальные колонии, так называемые биопленки ⁶. Это сообщества микроорганизмов, встроенных в матрикс внеклеточных полимерных веществ, продуцируемых самими бактериями и включающих в себя белки, полисахариды, нуклеотиды. Планктонные (свободноживущие) формы – это только стадия развития микробного сообщества. Механизм образования биопленок расценивается как фактор патогенности ⁶. «Именно бактериальные колонии позволяют микроорганизмам сохраняться в организме на длительное время и проявлять свою вирулентность», – сообщил профессор Спивак.

Один из самых актуальных вопросов, волнующих урологов, – можно ли вылечить хроническое воспаление в ПЖ или любое другое хроническое воспаление? В настоящее время специалисты придерживаются позиции, что вылечить хроническое воспаление нельзя, но можно увеличить длительность безрецидивного течения заболевания. «Для этого можно: улучшать микроциркуляцию в ткани простаты, увеличивать биодоступность антибиотиков, подавлять гиперплазию соединительной ткани, повышать эластичность рубцово-измененных зон, ингибировать причину – воспалительный процесс, снижать вязкость матрикса соединительной ткани, облегчать движение жидкости в межклеточном пространстве. То есть очень много аспектов, на которые мы можем влиять», – отметил эксперт.

«Это было доказано в ряде исследований с применением препарата Лонгидаза^®. Это комбинированный препарат. Высокомолекулярный полимер азоксимера бромид, химически соединенный с гиалуронидазой, выполняет роль ее стабилизатора и носителя. Данное лекарственное средство было разработано российскими учеными Института иммунологии РАМН и специалистами компании «Петровакс». Важно, что носитель остается фармакологически активным и сохраняет свои хелатирующие, антиоксидантные, противовоспалительные и иммуномодулирующие свойства. Такая инновационная разработка не имеет аналогов. Она признана Всемирной организацией здравоохранения как оригинальный препарат, получивший собственное международное непатентованное наименование в 2015 году», – сообщил профессор Спивак.

Лонгидаза^® решает важные задачи терапии ХП и доброкачественной гиперплазии ПЖ: это уменьшение отека, нормализация параметров секрета ПЖ, улучшение микроциркуляции в ПЖ, антипролиферативная активность (прекращает разрастание стромальной зоны), противовоспалительное действие, уменьшение объема ПЖ ^7–9.
Было подчеркнуто, что биопленки – естественная форма существования микроорганизмов и их нужно разрушать. Есть несколько способов разрушения биопленок. Первый – это ультразвук. Применение данного метода изучалось только в экспериментальных исследованиях, до сих пор нет четкого понимания механизма его воздействия, подтверждений эффективности. Второй метод – воздействие на коммуникацию микроорганизмов, именуемое «чувством плеча» (Quorum sensing). Для обмена информацией в пределах биопленки между отдельными клетками одного или разных видов бактерии используют сигнальные молекулы системы Quorum sensing, что и обеспечивает преимущества биопленок – защищенность от иммунитета и антибактериальных препаратов. 

И третий, единственный метод с доказанной эффективностью – ферментативный гидролиз, предполагает применение препарата бовгиалуронидазы азоксимер ¹⁰. Этот способ обладает благоприятным профилем безопасности, преимуществами при комбинировании с антибиотиками, он противодействует развитию антибактериальной резистентности ¹⁰. 

Докладчик отметил, что научный интерес к гиалуронидазам растет: «Количество научных публикаций по гиалуронидазе в последние годы увеличивается экспоненциально, указывая на ее растущее клиническое значение. Очень часто препараты гиалуронидазы, в частности Лонгидаза^®, изучаются в различных областях медицины. Например, недавно мои коллеги представили научные исследования применения препарата Лонгидаза^® в пульмонологии – при заболеваниях легких, связанных с фибротическими изменениями, в т. ч. у пациентов, перенесших COVID-19. В ближайшие годы можно ожидать новых показаний для применения гиалуронидазы в хирургии, иммунологии, онкологии и других областях». 

Также специалист отметил, что в урологии препарат Лонгидаза^® имеет огромное значение, поскольку наиболее распространенные возбудители ХП образуют биопленки ¹¹. Enterobacteriaceae, в частности Escherichia coli, энтерококк, стафилококк и Pseudomonas spp. – все эти микроорганизмы способны образовывать биопленки, как и Ureaplasma spp., а также заражать клетки ПЖ ¹¹. Также есть исследования, подтверждающие, что обострение ХП происходит за счет активаций бактерий в биопленке ¹². При этом 63% штаммов Escherichia coli, вызвавших хронический простатит, – продуценты биопленки, в отличие от 40% штаммов Escherichia coli, вызывающих цистит и пиелонефрит ¹³. 

Л.Г. Спивак сообщил, что эффективность бовгиалуронидазы азоксимера с точки зрения воздействия на биопленки подтверждена в ряде экспериментальных исследований ¹⁴. В частности, докладчик представил результаты исследования А.Р. Каюмова о влиянии изолированного и комбинированного с антимикробными средствами препарата Лонгидаза^® на целостность бактериальных пленок и жизнеспособность микроорганизмов. Была продемонстрирована эффективность препарата в разрушении биопленок in vitro ¹⁵. На конгрессе Российского общества урологов ректор Смоленского государственного медицинского университета Роман Сергеевич Козлов демонстрировал результаты нового, только что завершенного исследования воздействия препарата ­Лонгидаза^® на матрикс биопленок различных микроорганизмов. Было подтверждено, что препарат работает in vitro, в экспериментальных условиях. «Тем не менее нам нужны были клинические следования, чтобы доказать эффективность препарата in vivo», – добавил докладчик. 

Группа ученых: Л.Г. Спивак, М.А. Газимиев , М.С. Евдокимов, О.А. Мхитарян, К.А. Россоловская, – изучила влияние бовгиалуронидазы азоксимера на возможность разрушения биопленок в эякуляте пациентов с ХП и связанных с ним нарушений фертильности. Это первое исследование in vivo в реальной клинической практике. В исследование были включены 98 пациентов в возрасте от 19,5 до 52,7 года. Одна группа пациентов получала стандартную антибактериальную патогенетическую терапию в комбинации с препаратом Лонгидаза^® (лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 3000 МЕ, курс – 15 инъекций с интервалом в 3 дня), вторая – только патогенетическую терапию. Основными задачами исследования были: изучение субъективных и объективных изменений у пациентов с ХП и связанных с ним нарушений фертильности на фоне применения препарата Лонгидаза^®. Применялись такие методы лабораторной диагностики, как исследование эякулята (Андрофлор), светооптическое семиологическое исследование (спермограмма), электронно-микроскопическое исследование сперматозоидов (ЭМИС). 

Основной задачей исследования было изучение количественных и качественных изменений биопленок при воздействии на них препарата Лонгидаза^®. Было показано, что в группе комбинированной терапии количество бактериальных колоний и нейтрофилов достоверно снижалось. Более того, в группе пациентов, получающих бовгиалуронидазу азоксимер, частота элиминации бактериальных колоний и нейтрофилов, по данным ЭМИС, была значительно выше (рис. 1). Полная элиминация при добавлении бовгиалуронидазы азоксимера достигалась в 4 раза чаще.

Также была показана положительная динамика снижения содержания лейкоцитов при светооптическом микроскопическом исследовании. Значительным показателем эффективности препарата Лонгидаза
^® было достоверное снижение количества рецидивов в течение 12-месячного периода наблюдения. В группе комбинированной терапии количество обострений было значительно меньше (рис. 2).

Также было отмечено снижение выраженности субъективной симптоматики. Пациенты в первую очередь отмечали уменьшение болевого синдрома и повышение качества жизни (рис. 3). 

Докладчик привел несколько клинических примеров применения препарата Лонгидаза
^® у пациентов с ХП и нарушением фертильности. У них отмечалось снижение количества лейкоцитов, отсутствие агглютинации, увеличение количества подвижных сперматозоидов. «Комплексный анализ эякулята показал, что при применении препарата Лонгидаза^® количество подвижных сперматозоидов у пациентов вырастает в 2, 3, 9 раз. Был случай, когда количество сперматозоидов у бесплодного пациента увеличилось с нескольких штук до 4 миллионов», – рассказал Л.Г. Спивак.

Специалист представил еще один клинический пример, в котором было продемонстрировано снижение количества биопленок крупных бактерий с мощной клеточной стенкой. До терапии препаратом Лонгидаза^® у больного было 8 бактериальных колоний на 100 сперматозоидов. После терапии – 4 бактериальные колонии, окруженные уже не клеточной стенкой, а мембранными слоями. Нейтрофилы не были обнаружены. «Это очень наглядные результаты, – подчеркнул профессор Спивак, – поскольку эякулят – это материал, которым мужчина обменивается с женщиной. Бактериальные микроколонии прикрепляются к головке и жгутику сперматозоида, и вместе со сперматозоидом в организм женщины попадают биопленки патогенных микроорганизмов». 

Докладчик сообщил, что сейчас в Сеченовском Университете проводится исследование влияния бовгиалуронидазы азоксимера на полимикробные биопленки в урогенитальном тракте у женщин репродуктивного возраста с рецидивирующим бактериальным вагинозом. Впервые будет проведен ультраструктурный анализ соскоба эпителия влагалища методом электронной микроскопии до и после комплексного лечения с использованием препарата Лонгидаза^®, зарекомендовавшего себя как эффективное средство для разрушения биопленок.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ

1. Локшин К.Л. Простатит. Интегративная урология. Руководство для врачей под ред. П.В. Глыбочко, Ю.Г. Аляева. М.: Медфорум, 2014:314–326.
2. Аковбян В.А. Рациональная терапия инфекций, передаваемых половым путем: основные принципы и реальность. М.: Медиа Сфера, 2007:129–134.
3. Wenninger K., Heiman J.R., Rothman I., 
Berghuis J.P., Berger R.E. Sickness impact of chronic nonbacterial prostatitis and its correlates. J Urol. 1996;155(3):965–968.
4. Классификация хронического простатита Национального института здоровья США, 1995.
5. Farsimadan M., Motamedifar M. ­Bacterial infection of the male reproductive system causing infertility. J Reprod Immunol. 2020;142:103183.
6. Stoodley P., Sauer K., Davies D.G., Costerton J.W. Biofilms as complex differentiated communities. Annu Rev Microbiol. 2002;56:187–209.
7. Инструкция по медицинскому применению препарата Лонгидаза.
8. Шатохин М.Н., Теодорович О.В., Конопля А.И., Мальцев В.Н., Локтионов А.Л., Краснов А.В. Коррекция местных иммунометаболических нарушений при аденоме предстательной железы в сочетании с хроническим простатитом. Урология. 2010;5:22–26.
9. Кульчавеня Е.В., Швецова О.П., Бреусов А.А. Обоснование назначения и эффективность препарата Лонгидаза у больных хроническим простатитом. Урология. 2018;4:64–71.
10. Gupta P., Sarkar S., Das B., Bhattacharjee S., Tribedi P. Biofilm, pathogenesis and prevention--a journey to break the wall: a review. Arch Microbiol. 2016;198(1):1–15.
11. Mazzoli S. Conventional bacteriology in prostatitis patients: microbiological bias, problems and epidemiology on 1686 microbial isolates. Arch Ital Urol Androl. 2007;79(2):71–75.
12. Mazzoli S. Batteri e biofilm nelle infezioni genito-urinarie. Biofilm and bacterial microrganisms in genito-urinary infections. Infez Med. 2009;17(Suppl 1):3–9.
13. García-Castillo M., Morosini M.I., Valverde A., Almaraz F., Baquero F., Cantón R., del Campo R. Differences in biofilm development and antibiotic susceptibility among Streptococcus pneumoniae isolates from cystic fibrosis samples and blood cultures. J Antimicrob Chemother. 2007;59(2):301–304.
14. Trizna E., Baidamshina D., Gorshkova A., Drucker V., Bogachev M., Tikhonov A., Kayu­mov A. Improving the Efficacy of Antimicrobials against Biofilm-Embedded Bacteria Using Bovine Hyaluronidase Azoximer (Longidaza®). Pharmaceutics. 2021;13(11):1740.
15. Материалы конгресса Российского общества урологов, Казань, 14–16 сентября 2023 г.